丁酸钠对新生大鼠回肠黏膜屏障的保护作用

作者：岳雷; 郭世坤; 林正秀; 黄晓忠; 李仲荣^*

来源：中华小儿外科杂志, 2020, 41(04).

• 大鼠
• 丁酸钠
• 肠黏膜屏障

目的探讨丁酸钠在活体新生SD大鼠肠屏障功能中的保护作用, 建立丁酸钠对活体肠黏膜作用的量效关系。方法将出生后9 d龄的新生SD大鼠按照随机数字表法分为5组, 其中4组使用丁酸钠(sodium butyrate, NaB), 浓度分别为20 mmol/L、40 mmol/L、80 mmol/L、160 mmol/L等4组, 对照组使用0.9%生理盐水;经回肠灌注不同浓度的NaB作用1 h后取回肠组织, 在尤斯灌注系统(Ussing Chamber)上测定跨上皮电阻(transepithelial electrical resistance, TER)值, 苏木精-伊红(HE)染色观察病理学及炎症损伤情况, 实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测紧密连接蛋白(Occludin、ZO -1)的mRNA表达量, Western blot法检测Occludin、ZO -1蛋白的表达水平。结果尤斯灌注系统测得对照组在30 min、60 min、120 min时的相对TER值(各个时间点测得的TER值除以0 min测得TER值得到的百分比值)分别为(87.36±1.88)、(85.98±0.99)、(101.03±1.47), 20 mmol/L组分别为(83.45±2.97)、(107.24±5.35)、(101.44±3.96), 40 mmol/L组分别为(126.07±3.48)、(140.54±3.64)、(100.50±4.64), 80 mmol/L组分别为(102.24±4.60)、(134.55±7.80)、(106.76±8.82), 160 mmol/L组分别为(84.80±2.97)、(78.16±2.89)、(67.11±4.07);使用不同浓度NaB作用30 min, 与对照组相比, 40 mmol/L组的TER值明显增加(P<0.05), 作用1 h时, 40 mmol/L组与80 mmol/L组的TER值明显高于对照组、20 mmol/L及160 mmol/L组(P<0.05), 但二者的差异无统计学意义(P>0.05)。使用不同浓度NaB作用1 h后, 根据损伤分级评分(0～5分)结果, 160 mmol/L组(2.16±0.75)分, 较对照组(0.33±0.51)分损伤明显(P<0.01), 余各组损伤不明显(P>0.05)。40 mmol/L组及80 mmol/L组肠黏膜组织Occludin蛋白mRNA(1.80±0.31、2.13±0.90)表达量较对照组(1.01±0.21)上调, 差异具有统计学意义(P<0.05), 蛋白表达水平(0.58±0.04、0.73±0.01)较对照组(0.24±0.01)明显升高, 差异具有统计学意义(P<0.05);而ZO -1蛋白mRNA(1.36±0.24、1.45±0.58)表达量较对照组(1.01±0.11)上调不显著, 差异无统计学意义(P>0.05), 蛋白表达水平(1.46±0.04、1.34±0.07)较对照组(1.07±0.05)亦明显升高, 差异具有统计学意义(P<0.05);160 mmol/L组Occludin和ZO -1蛋白mRNA(1.27±0.47、0.92±0.25)表达量较对照组的差异无统计学意义(P>0.05), 而蛋白表达水平(0.47±0.01、2.90±0.04)均高于对照组, 差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 NaB对活体新生SD大鼠肠黏膜的作用具有浓度依赖性, 40 mmol/L或80 mmol/L的NaB能增强肠黏膜屏障的功能, 这可能与肠黏膜组织Occludin和ZO -1蛋白的表达增加有关。

• 单位
  周口市中心医院; 温州医科大学附属第二医院