盖他病毒Cap和E2蛋白多克隆抗体的制备

作者：莫清荣; 任同伟; 农作荣; 王豪; 黄静; 陈樱; 欧阳康; 黄伟坚; 韦祖樟^*

来源：动物医学进展, 2022, 43(09): 44-49.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2022.09.022

• 盖他病毒
• Cap蛋白
• E2蛋白
• 原核表达
• 多克隆抗体

为了制备盖他病毒(Getah virus, GETV)结构蛋白Cap和E2的多克隆抗体，将Cap和E2克隆到原核表达载体pET-32a中，然后将构建的表达质粒pET-32a-Cap/E2转化大肠埃希氏菌BL21(DE3)菌株，用IPTG诱导蛋白表达，非变性条件下用Ni-NTA琼脂糖树脂纯化重组pET-32a-Cap/E2蛋白。用纯化的重组蛋白多次接种新西兰大白兔，从而制备多克隆抗体，后续进行效价测定、Western blot与间接免疫荧光试验(IFA)验证抗体与病毒蛋白的反应。结果表明，Western blot与IFA显示制备的兔多克隆抗体能够与GETV抗原特异性结合；效价测定表明了制备的兔多克隆抗体Cap和E2效价均可达到1∶64 000。研究制备的多克隆抗体特异性良好，为GETV检测制剂的研发提供了良好的生物材料，为GETV蛋白功能的研究奠定了基础。

• 单位
  广西大学