miR-22在压应力下软骨终板细胞中的表达及其对靶基因MMP-1的调控作用

作者：丁亮; 薛锋^*; 肖海军; 沈玉春; 赵勇

来源：生物骨科材料与临床研究, 2020, 17(03): 1-5.

• 压应力
• 软骨终板
• microRNA
• 基质金属蛋白酶

目的应用miRNA芯片技术筛选压应力下人软骨终板细胞中差异表达的miRNAs,研究与压应力相关的miR-22并进行生物信息学分析,探讨其对靶基因MMP-1的调控。方法将6个月意外流产胎儿软骨终板进行软骨终板细胞的分离、培养。将第2代软骨细胞按实验要求种板培养并随机分为加压组与对照组。加压组施加周期性压力(5 MPa,6 h×5 d),使用TRIzol法提取各组RNA,miRNA芯片检测miRNA表达情况,然后用Realtime PCR(RT-PCR)对差异表达miR-22进行验证。通过靶基因预测软件预测MMP-1与miR-22基因的关系,miR-22 mimics脂质体转染Hela细胞后通过RT-PCR进一步验证。结果芯片扫描结果显示加压组miR-22下调明显。RT-PCR检测显示压应力下人软骨终板细胞miR-22表达显著降低。miR-22 mimics转染目标细胞48 h后,miR-22的表达显著增高,同时MMP-1基因表达显著降低。结论压应力下miR-22异常表达,miR-22可靶向负调控与软骨终板细胞退变相关的MMP-1基因。