基于TNF-α-HIF-1α-iNOS-NO信号通路探讨大黄素对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的影响

作者：潘书涵; 王永萍^*; 张阳

来源：时珍国医国药, 2020, 31(04): 817-820.

• 大黄素
• 类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞
• TNF-α-HIF-1α-iNOS–NO信号通路

目的研究大黄素对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)肿瘤坏死因子ɑ(TNF-α)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)以及一氧化氮(NO)表达的影响,探讨大黄素通过调控TNF-α-HIF-1α-iNOS–NO信号通路干预RA的机制。方法培养来源于人的RA-FLS与正常-FLS,设立正常组、模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组、阳性组。正常组用正常-FLS,其余5组用RA-FLS。高/中/低剂量组分别予80μmol·L-1、40μmol·L-1及20μmol·L-1的大黄素溶液。阳性组予0.1mg·L-1地塞米松溶液。药物干预24h、48h、72h、96h,用HE染色法观测滑膜细胞的生长和形态学改变;用ELISA法与硝酸还原酶法检测滑膜细胞培养液中TNF-α、HIF-1α、iNOS及NO表达变化;用Western blot法检测滑膜细胞中TNF-α、HIF-1α以及iNOS表达水平。结果 HE染色结果显示:以梭形为主的滑膜细胞均贴壁生长,卵圆形胞核居于细胞中央,RA-FLS明显比正常-FLS增长迅速。ELISA与硝酸还原酶法检测结果显示:RA-FLS细胞培养液中TNF-α、HIF-1α、iNOS以及NO表达在24h、48h、72h、96h均明显高于正常组(P<0.05),不同浓度大黄素不同时间段给药后TNF-α、HIF-1α、iNOS以及NO表达均有降低,尤其是给药80μmol·L-1,干预96h下降最多(P<0.05)。Western blot检测结果显示:药物干预96h后,大黄素组和阳性组RA-FLS细胞中TNF-α、HIF-1α及iNOS蛋白表达较之模型组均有减少,其中高剂量组下降幅度最大,低剂量组下降幅度最小,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大黄素对RA具有治疗作用,其机制可能与抑制RA-FLS TNF-α-HIF-1α-iNOS–NO信号通路开放有关。

• 单位
  贵州中医药大学