基于miRNA-mRNA调控网络筛选与验证参与Graves病B细胞增殖的关键基因

作者：王玮; 杨倩; 王凯; 钟惠敏; 潘凡凡; 查兵兵^*

来源：中国免疫学杂志, 2022, 38(22): 2770-2776.

DOI：10.3969/j.issn.1000-484X.2022.22.015

• Graves病
• B细胞
• miRNA
• CD79B
• 微阵列

目的：利用生物信息学筛选出Graves病（GD）患者外周血B细胞中差异表达的miRNA，构建miRNA-mRNA调控网络，为GD治疗提供新靶点。方法：采用微阵列技术检测初发GD患者和健康受试者外周血CD19+B细胞中miRNA和mRNA表达谱。利用TargetScan和miRBase数据库对差异miRNA的靶基因进行预测，与差异mRNA取交集，筛选出目的靶基因。构建miRNA-mRNA差异表达网络，对其进行GO注释分析，筛选出与B细胞增殖相关的mRNA并采用荧光定量PCR(qRTPCR)以及流式细胞术（FACS）等手段进行验证。结果：GD患者外周血CD19+B细胞中有119个差异表达miRNA和572个差异表达mRNA，并筛选到159个潜在靶基因。通过构建miRNA-mRNA差异表达网络以及GO注释分析等手段，证实与B细胞增殖相关的CD79B在GD患者外周血CD19+B细胞中表达升高。qRT-PCR和FACS验证得出GD患者外周血CD19+B细胞中CD79B mRNA和蛋白水平均显著上调（P<0.01）。对调控CD79B的miRNA富集并进行qRF-PCR验证，结果显示GD患者外周血CD19+B细胞中hsa-miR-146b-5p表达显著下调（P<0.001）。利用TargetScan数据库预测发现CD79B mRNA的3’端非编码区存在潜在的hsa-miR-146b-5p结合位点。结论：GD患者外周血B细胞中hsa-miR-146b-5p的下调可能促进CD79B上调，引起B细胞活化与增殖。CD79B有望成为GD新的生物标志物和治疗的潜在靶点。

• 单位
  复旦大学; 上海市第五人民医院