摘要

硫酯酶在脂肪酸生物合成过程中起重要作用。异源和同源表达是研究基因功能的重要环节,本研究对C.glutamicumATCC13032中可能编码硫酯酶的基因NCgl2365和NCgl0090进行异源和同源表达,进一步鉴定其对脂肪酸合成的作用。结果表明硫酯酶的过表达对大肠杆菌和谷氨酸棒杆菌中脂肪酸的种类和含量都产生了影响。基因NCgl2365在大肠杆菌中过表达后总脂肪酸产量增加了40%,且促进了饱和脂肪酸C16:0、C18:0和不饱和脂肪酸C17:1的生成;在谷氨酸棒杆菌中同源表达后总脂肪酸产量提高了33%,C17:0脂肪酸占比增加了80%,而C12:0、C17:1、C18:0、C18:1的占比有所减少。基因NCgl0090在大肠杆菌中过表达后总脂肪酸产量增加了61%,促使饱和脂肪酸C16:0、C18:0和不饱和脂肪酸C17:1的生成;而在谷氨酸棒杆菌中同源表达后总脂肪酸产量提高了59%,其中C16:0占比增加了40%,促进C14:0、C15:0、C16:1、C18:2、C20:1和C21:0的合成。结果表明基因NCgl2365和NCgl0090对宿主菌体中的脂肪酸代谢产生重要的作用,为后期进一步构建脂肪酸高产菌株奠定了良好的基础。

全文