黄杆菌肝素酶I基因的克隆与表达

作者：傅文彬; 熊可强; 阚梦元; 赵健; 李素霞; 姬胜利; 袁勤生

来源：食品与药品, 2008, (07): 5-7.

• 肝素酶I
• 克隆
• 基因表达
• 酶活性 heparinase I
• clone
• genetic expression
• enzyme activity

目的克隆并表达黄杆菌肝素酶I(HepI)基因。方法通过PCR从黄杆菌基因组DNA中扩增黄杆菌HepI基因,验证后插入到表达质粒pET-22b中构建表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行蛋白质表达,并用Azure A法测定酶活性。结果PCR扩增得到序列正确的HepI基因,并将该基因成功插入到pET-22b表达载体中。重组质粒转入E.coli BL21(DE3)后表达的蛋白质经SDS-PAGE分析,与目的蛋白质的相对分子质量基本一致,其活性约为50 U/LA600。结论克隆并成功表达了黄杆菌HepI基因。

• 单位
  山东大学; 生物反应器工程国家重点实验室; 华东理工大学