摘要

目的探讨MDA-5在同型半胱氨酸(Hcy)致巨噬细胞炎症反应中的作用及机制。方法巨噬细胞用Hcy干预24 h,ELISA检测TNF-α和IL-6含量;荧光定量PCR和western-blot检测MDA-5、DNA甲基转移酶(DNMTs)的m RNA和蛋白表达;巢式降落式甲基化特异性PCR检测MDA-5启动子区甲基化水平;将MDA-5重组腺病毒(AdMDA-5)和干扰片段(si-MDA-5)转染巨噬细胞检测细胞内TNF-α和IL-6含量。结果 Hcy干预细胞后,细胞内TNF-α和IL-6含量分别增加了37.5%(t=2.243 0,P=0.035 4)和25%(t=2.464,P=0.031 4),MDA-5的mRNA和蛋白表达也分别增加了52.5%(t=3.522,P=0.012 5)和41.3%(t=3.183,P=0.019 0),而MDA-5启动子区甲基化水平降低了30.1%(t=3.377,P=0.027 9),DNMT3a表达降低了32.7%(t=3.258,P=0.031 1);过表达MDA-5后,细胞内TNF-α和IL-6含量比Hcy组分别增加了60.1%(t=2.625,P=0.039 3)和64.6%(t=8.867,P=0.000 1),而干扰MDA-5的表达,TNF-α和IL-6含量分别比Hcy组降低了13.6%(t=4.188,P=0.005 8)和23.6%(t=3.958,P=0.007 2)。结论MDA-5 DNA低甲基化介导了Hcy诱导的巨噬细胞炎症反应。