M1型巨噬细胞对脑胶质瘤细胞侵袭能力影响机制研究

作者：金亮^*; 金艳; 赵立智

来源：中华肿瘤防治杂志, 2019, 26(18): 1329-1334.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2019.18.03

• M1型巨噬细胞
• 脑胶质瘤
• 肝细胞生长因子
• 侵袭

目的慢性炎症是多数肿瘤发生的高危因素,巨噬细胞是慢性炎症的参与者,可通过旁分泌的方式释放因子影响肿瘤的生物学行为。本研究观察M1型巨噬细胞对人脑胶质瘤U251细胞侵袭能力的影响,并对其机制进行探讨。方法以c-Met阳性脑胶质瘤细胞U251为研究模型,转化外周血单核细胞THP1为M1型巨噬细胞,培养并收集M1条件培养基(M1CM),M1CM刺激模型细胞设为M1CM组,INCB28060干预细胞内c-Met活性设为INCB28060组,RT-qPCR检测M1巨噬细胞标志物CD80和CD86表达水平,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测M1CM中肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)浓度,侵袭小室实验考察细胞的侵袭能力,蛋白质印迹法检测各蛋白表达变化。结果与M0巨噬细胞相比,M1巨噬细胞CD80mRNA水平上调,t=14.87,P<0.001;CD86mRNA水平上调,t=25.82,P<0.001。M0CM中HGF浓度为(6.3±0.5)nmol/L,M1CM中HGF浓度为(68.6±5.1)nmol/L,与M0CM相比,M1CM中HGF浓度增加,t=20.13,P<0.001。以c-Met阴性细胞T-47D为对照,检测发现U251细胞为c-Met阳性。与空白组相比,M1CM与MEM培养基1∶3、1∶2、1∶1混合刺激模型细胞24h,细胞侵袭能力均增加,均P<0.001。细胞p-c-Met、p-Erk及基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)蛋白表达水平均显示上调,均P<0.001。与空白组相比,INCB28060(2μmol/L)预处理能抑制M1CM诱导的模型细胞侵袭活动,t=25.615,P<0.001。与空白组相比,INCB28060预处理能抑制M1CM诱导的模型细胞p-c-Met(t=16.25,P<0.001)、p-Erk(t=15.57,P<0.001)及MMP-9(t=7.52,P=0.001 7)蛋白表达上调。结论 M1巨噬细胞可能通过分泌HGF促进脑胶质瘤U251细胞侵袭,该作用与c-Met介导Erk磷酸化和MMP-9蛋白表达上调有关。

• 单位
  沧州市传染病医院; 沧州市人民医院