金黄色葡萄球菌中毒性休克综合征毒素-1 PCR检测方法的建立与初步应用

作者：张晓丽; 陈卓; 于佳鑫; 孙悦青; 王洋; 栾剑; 周晓梅; 郭海勇^*

来源：河北农业大学学报, 2019, 42(06): 97-102.

DOI：10.13320/j.cnki.jauh.2019.0128

• 金黄色葡萄球菌
• 超抗原
• 中毒性休克综合征毒素-1
• PCR

试验旨在建立敏感、特异快速检测金黄色葡萄球菌超抗原中毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)的PCR方法。根据TSST-1毒素基因(tst基因)的序列,设计合成了特异性引物,优化了PCR方法的引物浓度、退火温度及DNA模板量,测定了方法的灵敏度与特异性,并应用所建立的PCR方法检测了67株金黄色葡萄球菌分离株中的tst基因。结果表明,建立的PCR方法的最佳退火温度为55℃、引物浓度为0.4μmol/L,检测灵敏度为20 pg DNA,与表皮葡萄球菌、猪链球菌、四联球菌、沙门氏菌和大肠杆菌等均不发生交叉反应。在67株金黄色葡萄球菌分离株中,13株携带tst基因,其中鸡源分离株中携带tst基因的菌株约占9.1%(1/11),牛源分离株中携带tst基因的菌株约占21.4%(12/56)。本研究建立的PCR方法能够快速、特异、敏感地检测金黄色葡萄球菌超抗原TSST-1毒素基因,为动物源性食品中TSST-1的检测及产TSST-1毒素菌株的流行病学调查提供重要技术支持。

• 单位
  吉林师范大学; 生命科学学院