N端非催化结构域对微泡菌ALW1褐藻胶裂解酶AlgL7酶学性质的影响

作者：黄小艺; 李鹤宾; 陈艳红; 姜泽东; 倪辉; 李清彪; 朱艳冰^*

来源：食品科学, 2023, 44(16): 169-176.

• 褐藻胶裂解酶
• 碳水化合物结合模块
• F5/8 C型结构域
• 酶学性质
• 酶解产物

为了明确非催化结构域碳水化合物结合模块(carbohydrate-binding module,CBM)和F5/8 C型结构域对褐藻胶裂解酶AlgL7酶学性质的影响，构建并表征了全长酶AlgL7和两个截短酶CD1(催化结构域)和CD2(包含F5/8 C型结构域和催化结构域)。结果表明，与全长AlgL7相比，截短酶CD2表现出更高的比活力、热稳定性和Km值，以及更高的最大反应速率(Vmax值)，表明CBM结构域在保持酶与底物的亲和力方面具有重要作用，但降低了酶的催化活性、热稳定性和Vmax值。与截短酶CD1相比，CD2表现出更高的比活力、最适反应温度、热稳定性、最大反应速率和Km值，表明F5/8 C型结构域有利于提高酶的催化活性、最适反应温度、热稳定性和最大反应速率，但降低了酶与底物的亲和力。以海藻酸钠为底物，截短酶CD2的比活力为183.9 U/mg，最适反应温度和最适反应pH值分别为40℃和7.0,Km值和Vmax值分别为39.80 mg/mL和2 000 U/mg，酶解产物主要为褐藻胶寡糖二糖和三糖。本研究促进了非催化结构域与褐藻胶裂解酶性质的构效关系研究，为利用非催化结构域改善褐藻胶裂解酶的催化性质提供了一定理论基础。

• 单位
  厦门医学院; 食品与生物工程学院; 集美大学