摘要
Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)糖蛋白D(Glycoprotein D,gD)在介导该病毒入侵到宿主细胞中起着关键作用.为了更好地研究gD在病毒侵入过程中的作用机制,利用杆状病毒表达系统表达了gD胞外部分区域(1~285 aa),通过Ni-NTA亲和层析以及分子排阻层析纯化后,得到的带His标签的分泌型可溶蛋白,用悬滴法对该蛋白进行了晶体筛选,获得了高质量的晶体.晶体生长条件为0.1 mol/L Hepes缓冲液(pH 7.2),5%(V/V)2-甲基-2,4-戊二醇(MPD),10%PEG10000,18℃.晶体能够衍射到1.8(A),属于P21空间群,晶胞参数为a=63.6,b=55.4,c=65.3(A),β=96.3°.该晶体的获得将为进一步研究gD的结构提供了基础,也为gD等同类囊膜蛋白的表达、纯化及结构研究提供了重要的参考.
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单位中国科学院; 生命科学学院; 中国科学院微生物研究所; 安徽农业大学