甘草干姜汤对顺铂所致巨噬细胞毒性的保护作用

作者：辛雨濛; 卢天公; 孙震晓^*

来源：中国药物警戒, 2023, 20(06): 661-670.

DOI：10.19803/j.1672-8629.20220716

• 顺铂
• 甘草干姜汤
• 活性氧
• 线粒体膜电位
• 细胞凋亡
• 小鼠肺腺癌
• 巨噬细胞
• 肿瘤坏死因子-α
• 白细胞介素6

目的 研究甘草干姜汤(LDGD)对顺铂所致巨噬细胞毒性的保护作用及机制。方法 体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7，噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度顺铂(1、2、3、4、6μg·mL-1)和LDGD(5、10、15、20 mg·mL-1)对RAW264.7细胞活力的影响，考察顺铂(2、3、4μg·mL-1)和LDGD(5、10、20 mg·mL-1)单用、序贯和同时作用对RAW264.7细胞的毒性作用；流式细胞术测定顺铂(4μg·mL-1)和LDGD(5、10、20 mg·mL-1)单用及不同方式联合作用对RAW264.7细胞凋亡、细胞活性氧(ROS)及线粒体膜电位的影响。雄性C57/BL6J小鼠24只，随机分为4组：对照组、模型组、顺铂组(4 mg·kg-1)、联用组(顺铂4 mg·kg-1+LDGD 5 g·kg-1)，每组6只。除对照组外其他各组接种小鼠肺腺癌细胞(LLC)后第2天，联用组小鼠连续灌胃给药LDGD 20 d，顺铂组和联用组每3 d腹腔注射顺铂，荷瘤21 d后处死小鼠，测定甘草干姜汤与顺铂联用对小鼠肿瘤体积、体重、脏器指数、脾脏T淋巴细胞分型、血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)等免疫因子水平及肿瘤切片中巨噬细胞浸润等的影响。结果与对照组相比，顺铂呈剂量依赖性抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7的细胞活力(P<0.01)，而LDGD各剂量组均能促进RAW264.7的细胞活力(P<0.01);LDGD能降低顺铂对RAW264.7细胞活力的抑制作用(P<0.01)，降低顺铂引起的RAW264.7细胞凋亡(P<0.01);LDGD能够逆转顺铂所致RAW264.7细胞的ROS水平升高及线粒体膜电位下降(P<0.01)；顺铂组和联用组均能显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长；顺铂能导致小鼠体重显著下降，肝脏指数显著升高，肾脏、脾脏和胸腺指数显著下降；联用组能使胸腺指数恢复到正常水平，肝肾和脾脏指数向对照组水平恢复；LDGD能在顺铂作用的基础上进一步提高小鼠脾脏CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞的水平；同时LDGD提高了肿瘤组织中的巨噬细胞浸润和小鼠血清TNF-α含量，降低了血清IL-6含量。结论 LDGD可能通过减少ROS产生和稳定线粒体膜电位抑制顺铂诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞凋亡，降低顺铂的细胞毒性；LDGD与顺铂联用，抗肿瘤同时能降低顺铂造成的小鼠肝肾和免疫器官损伤，促进巨噬细胞功能，进一步提高机体免疫水平。

• 单位
  生命科学学院; 北京中医药大学