应用抑制性消减杂交技术筛选乙型肝炎病毒表面抗原大蛋白的下调基因

作者：纪冬; 成军; 郭江; 刘妍; 陈国凤; 王琳

来源：中华老年多器官疾病杂志, 2005, (04): 282-286.

DOI：10.3969/j.issn.1671-5403.2005.04.012

• 乙型肝炎病毒
• 表面抗原
• 反式调节 hepatitis B virus
• surface antigen
• trans-regulation

目的筛选与克隆乙型肝炎表面抗原大蛋白(LHBs)的下调基因,以阐明HBV感染相关性疾病的分子生物学机制。方法应用常规分子生物学方法,克隆LHBs基因,构建真核表达质粒pcDNA3．1(-)-LHBs。将 pcDNA3．1(-)-LHBs与pCAT3-promoter共转染肝癌细胞系HepG2,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶 (CAT)的表达活性。分别以pcDNA3．1(-)-LHBs以及pcDNA3．1(-)转染HepG2细胞,提取mRNA并逆转录为cDNA,来源于pcDNA3．1(-)-LHBs转染细胞的cDNA为驱动(driver),来源于pcDNA3．1(-)的cDN...

• 单位
  北京地坛医院; 解放军第302医院