本申请公开了一种荧光与多光谱成像融合的黄曲霉毒素检测建模方法。该方法可以包括:获得含有不同浓度黄曲霉毒的粮食样本;通过荧光光谱检测,建立黄曲霉毒素含量与荧光光谱数据的拟合关系;根据拟合关系计算测试样品的黄曲霉毒素含量,提取测试样品的多光谱数据;根据测试样品的黄曲霉毒素含量与多光谱数据进行机器学习,获得基于多光谱数据的黄曲霉毒含量检测模型。本发明通过荧光光谱联合多光谱定标黄曲霉毒素,实现快速无损检测粮油食品中黄曲霉毒素含量的要求。