MicroRNA-143-3p靶向RANK对牙髓干细胞凋亡及分化能力的影响

作者：李明炜^*; 王云霞; 王静

来源：口腔颌面外科杂志, 2022, 32(04): 209-216.

• 人牙髓干细胞
• miR-143-3p
• 核因子κB受体活化因子
• 凋亡
• 分化

目的：探究microRNA-143-3p(miR-143-3p)对人牙髓干细胞（human dental pulp stem cells,hDPSCs）凋亡及分化能力的影响及其作用机制。方法：分离hDPSCs，并转染miR-143-3p抑制物（inhibitor）或核因子κB受体活化因子（receptor activator of nuclear factor-κB,RANK）小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)，通过流式细胞术检测细胞凋亡情况，对细胞进行成骨分化诱导后通过茜素红染色评估分化情况，分别用实时定量聚合酶链反应（real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞骨保护素（osteoprotegerin,OPG）、RANK、核因子κB受体活化因子配体（receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL）、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨钙素（osteocalcin,OCN）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)mRNA及蛋白表达，双荧光素酶实验分析miR-143-3p与RANK的靶向关系。结果：miR-143-3p在hDPSCs中的表达与RANK呈反向调控关系，抑制miR-143-3p的表达增加了细胞凋亡率，促进了细胞成骨分化，提高了RANK、RANKL、Runx2、OCN、ALP、BMP2的mRNA和蛋白表达水平，降低了OPG的mRNA和蛋白表达水平（P<0.05），而沉默RANK则抑制了miR-143-3p inhibitor的作用（P<0.05）。双荧光素酶实验提示，RANK是miR-143-3p的靶基因。结论：miR-143-3p通过靶向RANK激活OPG/RANKL轴调节hDPSCs的凋亡及成骨分化。

• 单位
  郑州人民医院; 郑州大学第一附属医院