丁苯酞对糖氧剥夺条件下人脑微血管内皮细胞炎症反应的调节作用

作者：韩晨阳; 张晓玲; 官俏兵; 王琰萍^*

来源：中国现代应用药学, 2019, 36(07): 804-808.

DOI：10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2019.07.007

• 丁苯酞
• 糖氧剥夺
• 人脑微血管内皮细胞
• 炎症反应

目的研究丁苯酞调节糖氧剥夺(oxygen-glucosedeprivation,OGD)条件下人脑微血管内皮细胞(humanbrain microvascularendothelialcells,HBMEC)炎症反应的机制。方法采用OGD方法处理HBMEC,将细胞分为对照组、模型组和丁苯酞低、中、高剂量组。其中对照组为正常培养的HBMEC,模型组为OGD处理的细胞,低剂量组为OGD+5μmol·L-1的丁苯酞,中剂量组为OGD+10μmol·L-1的丁苯酞,高剂量组为OGD+20μmol·L-1的丁苯酞。采用流式细胞术检测细胞凋亡水平,CCK-8法检测细胞活力的变化,Western-Blot法检测细胞中HMGB1、TLR4、NF-κB(p-P65)、caspase-1和procaspase-1的表达水平,免疫酶联法检测上清中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α),白细胞介素6(IL-6)的分泌水平。实时荧光定量PCR检测HMGB1、TLR4、NF-κB(P65)、caspase-1、IL-1β的mRNA表达。结果 OGD处理可以诱导HBMEC活力下调和HBMEC细胞凋亡,且具有时间依赖性,相比对照组具有显著性差异(P<0.05);而丁苯酞干预后,HBMEC细胞活力比模型组显著上调(P<0.05),细胞凋亡率比模型组显著下降(P<0.05)。OGD处理可以导致HBMEC中HMGB1-TLR4-NF-κB信号的激活,诱导炎症因子caspase-1、IL-1β的表达上调,相比对照组具有显著性差异(P<0.05);而丁苯酞干预可以显著下调HMGB1-TLR4-NF-κB信号的表达,下调caspase-1、IL-1β的表达。结论丁苯酞可能通过抑制HMGB1-TLR4-NF-κB信号的表达调节OGD下HBMEC细胞炎症反应。