外泌体介导的miR-18b-5p调控NEDD9对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响

作者：杨硕; 杨清玲^*

来源：蚌埠医学院学报, 2022, 47(02): 141-145.

DOI：10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2022.02.001

• 乳腺肿瘤
• 外泌体
• miRNA-18b-5p
• 神经前体细胞表达下调蛋白9

目的：探讨miR-18b-5p调控神经前体细胞表达下调蛋白9(NEDD9)对乳腺癌细胞侵袭、迁移的影响及其作用机制。方法：qRT-PCR检测人正常乳腺癌上皮细胞MCF-10A与2株乳腺癌细胞株(SKBR-3和SKBR-3/PR)中miR-18b-5p的表达水平；Western blotting检测SKBR-3/PR细胞来源外泌体的表面标志物；CCK8和Transwell实验检测SKBR-3/PR细胞转染miR-18b-5p inhibitor并提取的外泌体与SKBR-3细胞共培养后对SKBR-3细胞增殖和侵袭、迁移能力。生物信息学预测软件Target Scan预测miR-18b-5p与NEDD9的靶向结合位点。双荧光素酶实验分析miR-18b-5p与NEDD9的靶向调控关系。Transwell实验检测上调NEDD9对SKBR-3细胞侵袭迁移能力的影响。结果：miR-18b-5p在乳腺癌细胞株中相对于正常乳腺癌上皮细胞中高表达(P<0.01);SKBR-3/PR细胞来源的外泌体高表达CD63和TSG101等特异性蛋白(P<0.01),SKBR-3/PR细胞转染miR-18b-5p inhibitor提取外泌体后对SKBR-3细胞的增殖、侵袭和迁移显著被抑制(P<0.01)。生物信息学软件Target Scan预测结果显示，NEDD9 3′UTR上存在潜在与miR-18b-5p靶向结合的位点，miR-18b-5p能够负向调控NEDD9基因表达(P<0.01)。过表达NEDD9能抑制SKBR-3细胞侵袭能力(P<0.01)。结论：miR-18b-5p通过靶向NEDD9促进乳腺癌细胞侵袭、迁移。

• 单位
  蚌埠医学院