p53通过mTOR信号通路调节原始卵泡激活

作者：林欢; 任天和; 童云通; 吴贵凤; 张拓; 陈腾祥; 徐国强^*

来源：生理学报, 2023, 75(03): 339-350.

DOI：10.13294/j.aps.2023.0017

• 卵巢
• 原始卵泡激活
• p53
• mTOR通路
• PI3K/AKT通路

本文旨在探讨p53在原始卵泡激活中的作用及可能机制。首先检测生理状况下新生3、5、7、9天小鼠卵巢中p53mRNA和新生小鼠卵巢中p53的亚细胞定位情况，确定p53的表达模式。再选用新生2天和3天小鼠分别进行卵巢体外培养3天，分别添加p53抑制剂Pifithrin-μ(PFT-μ, 5μmol/L)或等体积二甲基亚砜，苏木素染色观察并全卵巢计数，确定p53在原始卵泡激活中的功能，采用免疫组化染色检测细胞增殖情况，用免疫荧光染色、蛋白印迹、qPCR检测原始卵泡相关经典通路关键分子的转录水平和蛋白水平变化。最后，采用雷帕霉素(rapamycin, RAP)干预mTOR信号通路，设立对照组、RAP(1μmol/L)组、PFT-μ(5μmol/L)组、PFT-μ(5μmol/L)+RAP(1μmol/L)组，苏木素染色并全卵巢计数确定各级卵泡数目情况。结果显示：在生理情况下，p53 mRNA表达水平随着原始卵泡的激活而降低；p53在原始卵泡和生长卵泡的颗粒细胞和卵母细胞胞质中均有表达，在原始卵泡中的表达高于生长卵泡；抑制p53促进卵泡激活并减少原始卵泡库存；抑制p53可促进颗粒细胞和卵母细胞增殖；抑制p53后PI3K/AKT信号通路关键分子(AKT、PTEN、FOXO3a)的mRNA和蛋白表达无显著变化，mTOR信号通路的下游RPS6/p-RPS6表达显著上调；抑制p53的同时抑制mTOR可以逆转抑制p53导致的原始卵泡激活。上述结果表明p53可能通过mTOR信号通路抑制原始卵泡激活，维持原始卵泡库存。

• 单位
  贵州医科大学; 基础医学院