摘要
为研究干法运输对中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)活力的影响,采用低温干露胁迫12、24、36 h及再浸润恢复12 h的处理方法,测定了体腔细胞超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(T-AOC)水平,通过流式细胞仪检测了细胞凋亡情况,利用实时定量PCR分析了溶菌酶基因LYZ、TLR1、Caspase-3、Caspase-9在不同时间干露胁迫下在体腔细胞的表达情况。结果表明:与对照组干露0 h相比,T-SOD活力、MDA含量和T-AOC水平呈现先升高后降低特征,干露12 h后最高,随后下降于复水12 h后接近对照组(P>0.05);免疫相关基因LYZ和TLR1总体上为先减弱后增强表达,分别在干露24、36 h时到达峰值,显著高于其他处理组(P<0.05),入水恢复12 h的表达也与对照组差异显著;发生凋亡的体腔细胞比率与T-AOC水平随干露时间延长的变化趋势相似,12 h后达到最高值,而Caspase-3、Caspase-9基因的表达具有时间累积效应,分别在24、36 h后显著高于对照组和其他处理组。研究表明,中间球海胆具有一定的耐干露能力,通过抗氧化酶系统维持活性氧自由基的动态平衡,溶菌酶、TLR1等固有免疫分子和Caspase依赖性细胞凋亡在应对干露胁迫维持内稳态的过程发挥重要作用。
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