细胞线粒体DNA缺失鉴定的Southern杂交方法的建立

作者：何玉琦; 凌贤龙; 张国桥; 李诗伟; 乐湘华; 晏斌; 周源; 李歆强

来源：Y201011026, 2010, (11): 1351-1353.

• DNA
• 线粒体
• 印迹法
• DNA
• 基因缺失 DNA
• mitochondrial
• blotting
• Southern
• gene deletion

目的建立一种简便、快捷、准确检测细胞线粒体DNA缺失的方法。方法将线粒体DNA所编码呼吸链中细胞色素氧化酶(COX)的亚单位COXⅠ和COXⅡ分别作为Southern杂交的分子探针,鉴别细胞株的线粒体DNA是否完全缺失。进行生长营养缺陷鉴定,并从RNA及蛋白水平对结果进行验证。结果 Southern杂交显示,SK-Hep1细胞可见COXⅠ、COXⅡ杂交条带,ρ°SK-Hep1细胞(线粒体缺失细胞)未见杂交条带形成,作为对比试验的生长营养缺陷法、PCR、Northern杂交和Western杂交,所得结果与Southern杂交结果一致。结论成功建立了鉴定细胞线粒体DNA缺失的Southern杂交方...

• 单位
  成都军区昆明总医院; 新桥医院