长双歧杆菌NCC2705株果糖结合蛋白BL0033基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

作者：郭燕红; 刘大伟; 何湘; 陈宣男; 黄留玉; 廖祥儒; 袁静

来源：生物技术通讯, 2009, 20(06): 773-775.

• 长双歧杆菌
• 果糖结合蛋白BL0033
• 基因克隆
• 融合表达 Bifidobacterium longum
• fructose binding protein BL0033
• gene cloning
• fusion protein

目的:克隆长双歧杆菌NCC2705株果糖结合蛋白BL0033的基因,利用大肠杆菌表达GST-BL0033融合蛋白并纯化。方法:以长双歧杆菌NCC2705株基因组为模板,PCR扩增BL0033基因,并将其插入pGEX-4T-1表达载体,转化至大肠杆菌DH5α;提取质粒,经PCR、质粒双酶切及测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21,并对表达条件进行摸索;用谷胱甘肽-Sepharose4B树脂对可溶性GST-BL0033融合蛋白进行纯化。结果:PCR扩增的BL0033基因长度接近1000bp,与预期值一致;重组菌在IPTG浓度为0.05mmoL/L的条件下,于16℃诱导过夜后,SDS-PAGE分析可见可溶...

• 单位
  江南大学; 生物工程学院; 中国人民解放军疾病预防控制所