摘要
目的探讨加味真武汤通过调控miR-377表达水平对糖尿病肾病(DN)细胞炎症水平和免疫功能的影响及分子机制。方法选取40只SPF级雄性大鼠, 对其中30只大鼠进行腹腔注射链脲佐菌素, 建立大鼠DN模型, 并随机分为模型对照组、加味真武汤低剂量组、加味真武汤高剂量组, 每组各10只。同时设置空白对照组(10只)。建立HK-2细胞的DN模型, 分为miR-NC+DN组(将miR-NC转染至建模后的HK-2细胞)、miR-377+DN组(将miR-377转染至建模后的HK-2细胞)、anti-miR-NC+DN组(将anti-miR-NC转染至建模后的HK-2细胞)、anti-miR-377+DN组(将anti-miR-377转染至建模后的HK-2细胞)、加味真武汤+miR-NC+DN组(将miR-NC转染至建模后的HK-2细胞, 再用高剂量加味真武汤处理)、加味真武汤+miR-377+DN组(将miR-377转染至建模后的HK-2细胞, 再用高剂量加味真武汤处理)。采用实时荧光定量PCR检测miR-377表达水平;采用酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)水平;采用流式细胞仪检测CD4+、CD8+和Th1水平。结果与空白对照组比较, 模型对照组的TNF-α、IL-6、IL-8、CD4+、miR-377水平升高, CD8+和Th1水平降低, 差异均有统计学意义(均P<0.001);与模型对照组比较, 加味真武汤低剂量组、加味真武汤高剂量组的TNF-α、IL-6、IL-8、CD4+、miR-377水平降低, CD8+和Th1水平升高, 差异均有统计学意义(均P<0.001)。与miR-NC+DN组比较, miR-377+DN组的TNF-α、IL-6、IL-8水平以及CD4+水平升高, CD8+和Th1水平降低(均P<0.001);与anti-miR-NC+DN组比较, anti-miR-377+DN组的TNF-α、IL-6、IL-8水平以及CD4+水平降低, CD8+和Th1水平升高(均P<0.001)。与加味真武汤+miR-NC+DN组比较, 加味真武汤+miR-377+DN组的TNF-α、IL-6、IL-8水平以及CD4+水平降低, CD8+和Th1水平升高(均P<0.001)。结论加味真武汤通过抑制miR-377表达减轻DN细胞炎症水平, 增强患者的免疫功能, 值得临床推广应用。
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单位北京中医医院; 中国人民解放军第305医院; 首都医科大学