人牙骨移植材料对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7增殖分化的影响

作者：李静静; 王稚英^*

来源：中国修复重建外科杂志, 2018, 32(10): 1332-1339.

• 牙骨移植材料
• 生物相容性
• 细胞毒性
• 单核巨噬细胞
• 口腔种植

目的探讨人牙骨移植材料对巨噬细胞增殖分化以及形态的影响,了解人牙骨移植材料的生物相容性和细胞毒性。方法收集新鲜人离体牙,制备人牙骨移植材料,共聚焦显微镜下观察小鼠单核巨噬细胞RAW264.7与人牙骨移植材料共培养后对材料黏附情况。扫描电镜观察人牙骨移植材料、OSTEONⅡ人工骨植入物及未处理牙粉的形貌。配制不同成分浸提液,分4组:A组(含10%FBS的DMEM培养液)、B组(人牙骨移植材料)、C组(OSTEONⅡ人工骨植入物)、D组(未处理牙粉)。分别将4组浸提液与细胞共培养,倒置显微镜观察细胞形态变化定性判定细胞毒性,结合MTT法检测细胞增殖分化结果及细胞相对增殖率定量判定细胞毒性;通过锥虫蓝染色检测各组细胞活力;ELISA法检测炎性因子TNF-α和IL-6表达。结果扫描电镜观察示,人牙骨移植材料和OSTEONⅡ人工骨植入物的表面都具有均匀的孔状结构,而未经处理牙粉胶原纤维结构及脱矿牙本质层全层塌陷,无特定结构。共聚焦显微镜观察示,细胞在人牙骨移植材料上生长良好。细胞与浸提液共培养后,观察示A、B、C组细胞形态和数量正常,毒性反应分级均为0级,而D组均为3级。MTT检测示,B、C组各时间点细胞毒性均为0级或1级,提示材料合格;D组培养1 d时细胞毒性为2级,3、5、7 d均为4级,结合细胞形态分析,提示材料不合格。锥虫蓝染色示,各时间点A、B、C组细胞数量均显著高于D组,差异有统计学意义(P<0.05),A、B、C组间差异无统计学意义(P>0.05)。ELISA检测示,各时间点A、B、C组TNF-α和IL-6含量均显著低于D组,差异有统计学意义(P<0.05);A、B、C组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论人牙骨移植材料与小鼠单核巨噬细胞共培养无细胞毒性,其浸提液对细胞增殖分化无明显影响,并不增加炎性因子表达,具有良好的生物相容性,有望用于临床骨缺损修复。

• 单位
  锦州医科大学