人源核受体hLRH-1的表达纯化及多克隆抗体制备

作者：肖利佳; 张然蓉; 张竞文; 王田园; 郝建华

来源：现代生物医学进展, 2015, 15(21): 4029-4032.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2015.21.008

• h LRH-1
• 重组蛋白
• 多克隆抗体

目的:制备抗人源核受体h LRH-1的多克隆抗体,为进一步研究其功能奠定基础。方法:构建含有h LRH-1基因全长克隆的原核表达载体p ET507a-h LRH-1并用IPTG诱导其在Rosseta2菌株中表达重组蛋白His-h LRH-1,经亲和层析纯化后按常规方法免疫新西兰兔制备多克隆抗体,并用Western Blot对其特异性进行鉴定。结果:原核表达载体p ET507a-h LRH-1经测序证实构建成功,将其转化大肠杆菌Rosseta2菌株后成功诱导表达重组蛋白His-h LRH-1,经纯化免疫新西兰兔后得到抗h LRH-1多克隆抗体,Western blot证实抗体具有高度特异性。结论:成功表达His-h LRH-1重组蛋白并制备出多克隆抗体,为进一步用于h LRH-1的免疫学检测及其功能研究奠定了基础。

• 单位
  广东医学院附属南山医院