hTSHR胞膜外区片段真核表达载体的构建和表达

作者：赵紫琴; 李兰英; 陆凤先; 朱学良; 朱云娟

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2008, (08): 785-787+790.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.004782

• TSH受体
• 真核表达
• Graves’病 TSHR
• eukaryotic expression
• Graves' disease

目的:构建人类促甲状腺激素受体(hTSHR)胞膜外区氨基端的两个片段hTSHRf(aa29~100)、hTSHRe(aa101~278)的真核表达载体pcDNA3.1-hTSHRf和pcDNA3.1-hT-SHRe,并在CHO细胞中进行表达。方法:RT-PCR法从人甲状腺正常组织的cDNA中扩增hTSHRf和hTSHRe,定向插入真核表达载体pcDNA3.1(D)/V5-His-TOPO中,经酶切、PCR和测序鉴定后通过脂质体介导转染至CHO细胞中进行表达,RT-PCR扩增转染细胞的cDNA、Western blot分别鉴定hTSHR在CHO细胞中mRNA和蛋白水平的表达。结果:RT-PCR分...

• 单位
  天津市公安医院; 天津医科大学代谢病医院; 天津医科大学