感染寨卡病毒后埃及伊蚊黄病毒NIRVS表达的检测

作者：刘源; 姜玉庭; 贾楠; 张恒端; 李春晓; 邢丹; 郭晓霞; 高剑^*; 赵彤言^*

来源：寄生虫与医学昆虫学报, 2022, 29(01): 33-39.

• 小RNA测序
• RT-qPCR
• 黄病毒NIRVS
• 埃及伊蚊
• 寨卡病毒

本研究通过高通量测序技术检测了寨卡病毒(ZIKV)感染组、血餐对照组和糖水对照组埃及伊蚊中肠组织小RNA的丰度，并筛选出差异表达的6个黄病毒NIRVS和9个棒状病毒NIRVS。针对筛选出的6个NIRVS设计引物用两步法逆转录荧光定量PCR(RT-qPCR)方法验证了ZIKV感染第4、7和10天中肠组织中黄病毒NIRVS片段的表达。结果显示，黄病毒NIRVS AeFlavi53在感染第4、7天均上调，结果与小RNA测序一致，AeFlavi34B和AeFlavi4A在感染第4天上调，第10天下调，但在第7天表达无变化，与小RNA测序结果不一致，其余片段表达量在感染组与对照组间无统计学差异。RT-qPCR与高通量测序的结果一致性差，其原因可能是因为细胞中长链piRNA前体受上游转录和下游酶切多个程序的调节，针对其设计引物进行定量检测的结果不稳定。

• 单位
  病原微生物生物安全国家重点实验室