二氧化硅通过激活线粒体和死亡受体途径介导小鼠RAW264.7巨噬细胞凋亡和极化的机制研究

作者：符蓉; 徐忠伟; 高宏生; 姚三巧; 杨震

来源：武警后勤学院学报(医学版), 2017, 26(10): 829-835.

DOI：10.16548/j.2095-3720.2017.10.001

• 二氧化硅
• 巨噬细胞
• 细胞凋亡
• 巨噬细胞极化

【目的】研究二氧化硅(Silica,SiO)粉尘对小鼠RAW264.7巨噬细胞凋亡和极化的作用及其发生机制。【2方法】实验分为小鼠RAW264.7巨噬细胞对照组和不同浓度SiO2粉尘悬液染尘组,MTT法检测细胞存活率,最终选取0、50、100、200μg/ml 4个浓度进行后续实验,以0μg/ml浓度组为对照组;Hoechst33342/PI双荧光染色法检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期;免疫荧光和流式细胞术检测巨噬细胞极化标志分子CD11b和CD86的表达;Western blotting检测细胞凋亡及细胞免疫应答相关分子诱导型一氧化氮合酶、肿瘤坏死因子α、Bax、Bcl-2、Caspase 8、p38、p-p38、ERK、p-ERK、NF-κB蛋白的变化。【结果】MTT结果显示,与对照组相比,SiO2粉尘可显著抑制RAW264.7巨噬细胞增殖活力,呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.05);荧光双染色结果显示SiO2粉尘可诱导巨噬细胞凋亡;流式细胞术分析显示SiO2可引起巨噬细胞周期S期阻滞(P<0.05);巨噬细胞极化标志分子CD11b+CD86+的比例由3.28%上升到20.3%(P<0.05);与对照组相比,染尘组细胞iNOS、Bax、TNF-α、Caspase 8、p-p38、p-ERK、NF-κB蛋白表达升高,而Bcl-2表达降低(P<0.05)。【结论】SiO2粉尘可通过线粒体和死亡受体途径介导RAW264.7巨噬细胞凋亡,同时通过激活MAPK信号通路促进巨噬细胞由M0向M1极化。

• 单位
  新乡医学院; 公共卫生学院; 武警后勤学院; 中心实验室