猫白介素31蛋白的真核细胞表达及应用

作者：郑予馨^*; 郭天玲

来源：现代畜牧科技, 2023, (07): 40-42.

DOI：10.19369/j.cnki.2095-9737.2023.07.010

• 猫白介素31
• 猫抑瘤素M受体β
• 蛋白表达
• Western Blot
• 流式

该文通过哺乳动物细胞表达系统表达猫白介素31(fIL-31)，并鉴定其与受体的结合。首先，构建重组质粒。其次，将重组质粒转染至293T细胞，经蛋白质印迹实验（Western blot）鉴定重组蛋白fIL-31-hFc的表达后，大量转染通过Protein A亲和层析和分子筛凝胶层析的方式纯化目的蛋白。最后，利用细胞流式的方法检测fIL-31-hFc与其受体猫抑瘤素M受体β(fOSMRβ)的结合情况。结果表明，fIL-31-hFc以可溶性的形式表达在细胞的上清中，经分子筛层析纯化后，可获得聚集形式均一的目的蛋白，该蛋白可与表达在细胞表面的fOSMRβ受体结合。

• 单位
  天津科技大学; 生物工程学院; 中国科学院天津工业生物技术研究所