秦川牛SREBP1基因重组腺病毒载体的构建与病毒包装

作者：付常振; 昝林森; 王虹; 姜碧杰; 成功; 王洪宝; 朱光星; 李耀坤; 王洪程

来源：畜牧兽医学报, 2013, (08): 1323-1329.

• 秦川牛
• SREBP1
• 腺病毒 Qinchuan cattle
• SREBP1
• adenovirus

克隆秦川牛的SREBP1基因并构建重组腺病毒表达载体,包装扩繁获得高滴度病毒,拟为在细胞水平上开展基因功能的研究奠定基础。本试验以秦川牛脂肪组织为试验材料,提取总RNA并反转得到cDNA,以Gen-Bank收录的牛的SREBP1基因mRNA序列设计引物,PCR扩增SREBP1基因与克隆载体pMD19-T Simple连接并测序鉴定。挑选测序正确的SREBP1基因酶切后连接到腺病毒穿梭载体上构建pAdTrack-CMV-SREBP1表达载体,用PmeⅠ限制酶酶切线性化,然后转染到含有骨架载体pAdEasy-1的E.coli BJ5183感受态进行同源重组,得到腺病毒重组载体pAd-SREBP1。...

• 单位
  国家肉牛改良中心; 西北农林科技大学