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摘要
目的探讨晚期糖基化终末产物（AGEs）调控其受体促进人股动脉平滑肌细胞钙化的机制。方法2014年1月—2015年3月,将股动脉中膜平滑肌层剪成12 mm组织块培养,选取38代平滑肌细胞用于实验。将平滑肌细胞分为4组,A组单纯于DMEM培养基中培养,B组于含10 mmol/Lβ磷酸甘油钠的DMEM培养基中培养,C、D组分别于含10 mmol/Lβ磷酸甘油钠的DMEM培养基中加入20、40 mg/L AGEs,各组平滑肌细胞干预培养96 h。合成3对随机AGEs受体（RAGE）siRNA,以50 nmol/L转染C组平滑肌细胞,24 h后进行siRNA沉默效果检测,选取转染效率较高的序列用于实验。分别取转染前后平滑肌细胞,采用Von Kossa染色实验观察平滑肌细胞内钙沉积情况,采用Western blotting法检测RAGE、β-catenin、骨保护素（OPG）表达水平。结果未转染的平滑肌细胞中,A组无钙化斑块形成,B组可见明显的钙化斑块;C、D组细胞质、细胞核呈现粉红色的数量增加,钙化斑块明显增多。经转染后,C组平滑肌细胞细胞质、细胞核呈现粉红色的数量较未转染细胞减少,钙化斑块形成受到抑制。未转染的各组平滑肌细胞RAGE、β-catenin、OPG表达水平比较,差异均有统计学意义（P<0.05）;其中,C组平滑肌细胞RAGE、β-catenin、OPG表达水平高于B组,D组平滑肌细胞RAGE、β-catenin、OPG表达水平高于B、C组（P<0.05）。C组平滑肌细胞转染后RAGE、β-catenin、OPG表达水平均低于转染前（P<0.01）。结论 AGEs通过与其受体结合而介导平滑肌细胞钙化,其机制可能为RAGE激活Wnt/β-catenin信号通路,使β-catenin下游蛋白OPG表达水平升高。
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