狂犬病病毒G蛋白的原核表达及反应原性分析

作者:王攀; 刘运超; 魏蔷; 柴书军; 陈玉梅; 张改平
来源:河南农业科学, 2017, 46(04): 108-112.
DOI:10.15933/j.cnki.1004-3268.2017.04.021

摘要

为优化狂犬病病毒G蛋白的原核表达条件,探究其反应原性,参照狂犬病病毒CTN-1V10株编码G蛋白基因序列,采用生物工程合成的方法合成编码G蛋白的基因片段,并将该片段命名为G5F。将该片段与pET-28a原核表达载体连接,构建重组表达质粒pET-G5F,并将重组质粒进行诱导表达,在IPTG浓度为0.2 mmol/L、温度为20℃、诱导12 h时,重组蛋白表达量最高。SDS-PAGE电泳及Western blot分析表明,G5F重组蛋白可溶性表达量高,且可以被抗狂犬病病毒单克隆抗体识别,反应原性良好。

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