低氧对小鼠肺动脉平滑肌细胞增殖及经典型蛋白激酶C表达的影响

作者：施熠炜; 蒋蕊; 秦小江; 曾超^*

来源：中华生物医学工程杂志, 2021, 27(06).

• 肺动脉平滑肌细胞
• 细胞增殖
• 低氧
• 蛋白激酶C
• 肺动脉高压

目的原代培养小鼠远端肺动脉平滑肌细胞(PASMC), 探讨低氧对PASMC增殖及经典型蛋白激酶C(cPKC)各亚型表达的影响。方法原代培养小鼠远端PASMC, 实验用4～8代传代细胞。采用免疫印迹、免疫荧光技术检测PASMC中cPKC各亚型的表达情况。将PASMC分为常氧组和低氧组, 分别置于普通培养箱(5% CO2)和低氧培养箱(3% O2、5% CO2)中培养。常氧和低氧培养24 h、48 h、72 h后, Brdu法检测两组细胞增殖能力变化, 免疫印迹技术、流式细胞术检测PASMC中cPKC各亚型蛋白的表达变化。结果免疫印迹、免疫荧光技术检测显示小鼠PASMC存在cPKCα、cPKCβⅠ和cPKCβⅡ的表达, 而无cPKCγ表达。免疫荧光检测显示, 与常氧组相比, 低氧24 h、48 h、72 h后低氧组PASMC的Brdu阳性细胞与DAPI阳性细胞比值均显著增高(均P<0.05), 其中低氧72 h时最明显。免疫印迹技术、流式细胞术检测结果显示, 与常氧组比较, 低氧24 h、48 h、72 h后低氧组PASMC中cPKCα、cPKCβⅠ、cPKCβⅡ蛋白表达均增高(均P<0.05)。结论低氧可能通过调控cPKCα、βⅠ和βⅡ信号通路诱导小鼠远端PASMC异常增殖。

• 单位
  山西医科大学; 山西医科大学第一医院; 山西省人民医院; 公共卫生学院