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摘要
为了探明葡萄抗霜霉病基因的抗病机制，分别以感病品种玫瑰香和抗病品种摩尔多瓦叶片为试材，离体接种葡萄霜霉病菌，在光照培养箱中培养。用JEOL-6360型扫描电子显微镜观察霜霉菌侵染不同品种叶片后的发育情况，并利用MGISEQ-2000高通量测序平台对2个品种进行转录组测序及差异表达基因分析。结果表明，玫瑰香在接种4 d后叶片背面出现肉眼可见的白色霉层，病斑随时间延长面积增大，叶片正面相应位置出现褪绿黄斑，而在摩尔多瓦叶片上仅在接种点处有少量黑斑。电镜观察结果显示，玫瑰香叶片上病原菌孢子侵入气孔，萌发长出新的孢子囊梗，释放出孢子，在叶片上繁殖；摩尔多瓦叶片上的孢子囊数量少，大部分气孔关闭，气孔周围有少量孢子、菌丝和组织碎片分布。转录组数据共获得约664.86 Mb高质量序列，与玫瑰香相比，在摩尔多瓦中检测到5 095个差异表达基因，其中2 975个为上调表达基因，2 120个为下调表达基因。GO分析显示，差异表达基因主要富集在生物学途径(代谢过程、细胞过程、对刺激的反应和生物调节类别)、细胞组分(细胞、膜、膜组分和细胞器)和分子功能(催化活性和组装、转运体活性、转录调节因子活性)三大类。KEGG分析差异表达基因，主要富集在植物病原菌互作途径和MAPK信号转导途径等通路中。选取其中9个可能与葡萄抗病性相关的基因，qRT-PCR结果表明，9个候选基因在葡萄响应霜霉菌侵染过程中发挥一定的作用。
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单位河北省农林科学院石家庄果树研究所
