摘要
目的:探讨缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液(HP extract)对PC12细胞缺氧耐受性的影响。方法:复制小鼠急性重复缺氧模型,制备HP extract。在培养PC12细胞中加入HP extract使其终浓度分别为0.2、0.8、3.2、6.4、12.8g/L(HP组)。以同浓度正常小鼠脑匀浆提取液(N extract)作为对照组(N组)。缺氧(2%O2)培养24、48、72h后,采用四唑盐(MTT)比色法检测各组细胞活力(A570值)并检测缺氧24、48、72h乳酸脱氢酶(LDH)透出率、缺氧24h早期凋亡率(Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测)、缺氧72h晚期凋亡率(Hoechst33258染色荧光显微镜检测)。结果:HP extract浓度低于6.4g/L(包括6.4g/L),缺氧培养24h时,HP组A570值显著高于同浓度N组,其LDH透出率显著低于同浓度N组。随缺氧时间延长,高浓度HP extract逐渐失去细胞保护作用。至72h时浓度高于6.4g/L(包括6.4g/L)HP extract有促细胞凋亡作用,此时HP组A570值显著低于同浓度N组,其LDH透出率和晚期凋亡率均显著高于同浓度N组。结论:缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液对PC12细胞缺氧耐受性的影响呈浓度依赖性和时间依赖性。
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单位重庆教育学院; 第三军医大学