摘要
目的探讨RNAi沉默中性粒细胞相关载脂蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)基因表达对胃癌细胞增殖凋亡的影响及机制。方法提取胃癌组织及相应癌旁组织中的总RNA及总蛋白,RT-PCR及Western blotting检测NGAL基因的mRNA及蛋白表达;将NC-siRNA组、NGAL-siRNA转染生长至对数期的人胃癌BGC823细胞,未转染任何siRNA的作为对照组,48 h后收集细胞,Western blotting检测NGAL、Ki67、PCNA、Cleaved caspase3、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达;CCK8实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡。结果胃癌组织中NGAL基因的mRNA及蛋白表达均显著高于癌旁组织(P<0.01);NC-siRNA组NGAL的蛋白表达与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),NGAL-siRNA组NGAL的蛋白表达显著低于对照组(P<0.01);与对照组及NC-siRNA组比较,NGAL-siRNA组细胞存活率及Ki67、PCNA、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达显著降低,细胞凋亡率及Cleaved caspase3蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论 NGAL基因在胃癌中高表达,RNA干扰其表达后可降低人胃癌BGC823细胞增殖及促进细胞凋亡,其机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。
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单位河南科技大学第一附属医院