牛生精母细胞/精原干细胞分子标记GFRα-1的验证

作者：杨蕊; 张博洋; 朱春玲; 张洪毅; 潘英树; 唐博; 张学明^*

来源：中国兽医学报, 2022, 42(03): 587-606.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.03.28

• 牛
• 生精母细胞
• 精原干细胞
• 分子标记
• 胶质细胞源神经营养因子家族受体α-1

生精母细胞(gonocytes)是幼龄雄性曲细精索中的未分化生殖细胞，随睾丸发育逐渐向生精上皮基膜迁移并发育为精原干细胞(spermatogonial stem cells, SSCs)。生精母细胞和SSCs的分离培养对体外探讨精子发生机理至关重要，而其特异分子标记验证又是分离培养的关键环节。胶质细胞源神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor, GDNF)能促进生精母细胞和SSCs的增殖，用GDNF家族受体α-1(GDNF family receptor alpha-1,GFRα-1)标记生精母细胞和SSCs已在啮齿类等动物得到证实，但在牛等大家畜则仍需验证。为此，本研究将冻存的新生牛睾丸组织复苏，从转录和蛋白水平对GFRα-1的表达进行了验证。荧光定量PCR分析显示，犊牛生精上皮表达多能性基因Nanog和较高水平的GFRα-1 mRNA;免疫荧光染色显示，曲细精索中的大圆形细胞表现为GFRα-1阳性，其定位和分布与苏木精-伊红染色显示的生精母细胞一致；分离培养后，这些细胞表现为生精细胞典型的团簇状形态，仍为GFRα-1和Nanog阳性。结果表明，GFRα-1可作为牛生精母细胞和SSCs相对特异的分子标记，为后续相关研究奠定了基础。

• 单位
  动物科学学院; 吉林大学