微小核糖核酸let-7c对肝癌细胞增殖的影响及其靶基因分析

作者：祖珊珊

来源：中国基层医药, 2020, 27(12).

• 肝肿瘤
• 核糖核酸酶类
• 基因, Let-7c
• 细胞周期蛋白依赖激酶6
• 细胞增殖
• 肿瘤转移
• 逆转录病毒科
• 基因, 肿瘤抑制
• 肿瘤细胞, 培养的

目的分析微小核糖核酸(mi RNA)let-7c通过靶定细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6)抑制肝癌细胞增殖的临床意义, 并探讨其对肝癌细胞增殖的影响以及靶基因。方法选取人低转移肝癌细胞-97L(MHCC-97L)、人高转移肝癌细胞(HCCLM3)、人肝癌组织(HepG2)、人肝癌细胞-7721(SMMC-7721)、人肝细胞LO2、小鼠抗人细胞周期蛋白依赖激酶抗体等进行细胞培养, 利用Western blot检测转染后小鼠CDK6表达情况, 转染48 h后应用细胞裂解液对三组蛋白进行提取, 将材料分为观察组、对照组、空白组, 观察组转染let-7c, 对照组转染阴性对照miRNA, 空白组未进行转染处理;应用二喹啉甲酸法对各孔细胞蛋白浓度进行测定。结果 let-7c对肝癌细胞HCCLM3增殖结果显示, 于450 nm处观察组、对照组转染后24 h吸光度值差异无统计学意义(P>0.05);转染48 h后观察组、对照组HCCLM3细胞中CDK6蛋白含量发生较大变化, 观察组的CDK6蛋白表达量为(0.58±0.05), 均低于对照组的(0.81±0.08)与空白组(0.85±0.09)(t=10.107、13.876, 均P<0.05);转染后72 h, 观察组细胞处于G1期比例为(56.21±3.25)%, 明显高于对照组的(45.21±1.56)%与空白组的(46.24±1.98)%, 差异均有统计学意义(t=16.146、13.862, 均P=0.000)。结论肝癌细胞中let-7c呈低表达, 将let-7c上调可有效调控CDK6, 从而抑制癌细胞生长, 对肝癌细胞增殖具有明显的抑制作用。