摘要
目的探讨YAP1-JUN在促进喉鳞状细胞癌细胞的增殖及上皮间质转化(EMT)过程中发挥的功能。方法通过组织免疫荧光实验检测Yes相关蛋白1(YAP1)的表达及亚细胞定位, 细胞克隆形成实验检测YAP1对喉鳞状细胞癌细胞增殖的影响, 蛋白质免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测YAP1对EMT相关分子标记基因蛋白表达和转录水平变化的影响, 免疫共沉淀(CoIP)及免疫印迹实验检测YAP1与JUN相互作用, 验证其共同调控下游基因表达以控制EMT过程。结果喉鳞状细胞癌组织细胞中YAP1表达增加, 且由细胞质转移至细胞核;YAP1上调后克隆形成数目显著增加(P<0.01);上皮细胞关键基因上皮性黏附蛋白(E-cadherin)表达水平在YAP1上调后被显著抑制(P<0.01), 而间质细胞关键基因β-连环蛋白(β-catenin)、波形蛋白(vimentin)及神经性钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平则显著上调(P<0.01);YAP1与核转录因子JUN相互作用, 抑制JUN表达后YAP1的促细胞增殖能力显著减弱(P<0.01), 同时EMT相关分子标记表达显著下调(P<0.01)。结论 YAP1结合JUN基因促进人喉鳞状细胞癌细胞的增殖及EMT过程。
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