miR-451a对慢性心衰细胞模型心肌细胞H9c2凋亡与自噬的影响

作者：朱继荣; 杨波; 张博媛

来源：中南医学科学杂志, 2023, 51(05): 650-654.

DOI：10.15972/j.cnki.43-1509/r.2023.05.006

• miR-451a
• mTOR信号通路
• 心肌细胞
• 凋亡
• 自噬
• 心衰

目的 探究miR-451a对慢性心衰细胞模型心肌细胞H9c2凋亡与自噬的作用机制。方法 采用1μmol/L阿霉素(DOX)建立慢性心衰细胞模型。将细胞实验分为Control组(正常心肌细胞H9c2)、DOX组(DOX培养)、DOX+miR-NC组(DOX培养转染对照miR-NC)、DOX+miR-451a组(DOX培养转染miR-451a模拟物miR-451a)、DOX+miR-451a+CCI-779组(DOX和CCI-779培养转染miR-451a)。qRT-PCR检测各组细胞miR-451a相对表达水平；CCK-8和流式细胞术分别检测细胞增殖活性与凋亡；Western blotting检测剪切的Caspase-3(cleaved Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3I(LC3I)、LC3II、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p70s6k、磷酸化mTOR(p-mTOR)、p-p70s6k蛋白表达。结果 成功建立慢性心衰细胞模型。与Control组比较，DOX组miR-451a相对表达水平、细胞活性、p-mTOR、p-p70s6k蛋白表达降低，而凋亡率、cleaved-Caspase-3、Bax、Beclin-1、LC3II/I蛋白表达升高。与DOX+miR-NC组比较，DOX+miR-451a组miR-451a相对表达水平、细胞活性、p-mTOR、p-p70s6k蛋白表达升高，而凋亡率、cleaved-Caspase-3、Bax、Beclin-1、LC3II/I蛋白表达降低。与DOX+miR-451a组比较，DOX+miR-451a+CCI-779组细胞活性降低，凋亡率、cleaved-Caspase-3、Bax、Beclin-1、LC3II/I蛋白表达升高。结论 miR-451a通过抑制mTOR信号通路促进慢性心衰细胞模型心肌细胞H9c2凋亡和自噬。

• 单位
  深圳市第二人民医院