产黄青霉penDE基因的克隆及其在带小棒链霉菌中的表达

作者：郭长明; 张惠展

来源：中国医药工业杂志, 2007, (01): 15-18.

• penDE基因
• 带小棒链霉菌
• 酰基CoA:6-APA酰基转移酶
• 产黄青霉 penDE gene
• Streptomyces clavuligerus
• acyl-CoA:6-aminopenicillanic acid acyltransferase
• Penicillium chrysogenum

penDE基因编码40k的酰基-CoA:6-APA酰基转移酶(IAT),可催化产黄青霉中青霉素生物合成途径的最后一步酶反应。利用RT-PCR法从产黄青霉中扩增得1.1kbp的不含内含子的penDE基因,并将其克隆至大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒pUWL201,使penDE基因位于ermEp*启动子的下游,再将其转化带小棒链霉菌,获得了能够表达IAT的转化子。PDAB法和抗菌活性测定表明,所表达的IAT蛋白对6-氨基青霉烷酸和苯乙酰CoA有明显的活性。