金复康口服液含药血清调控肺癌淋巴管新生机制探讨

作者：彭文潘; 徐泳; 王志超; 冯凡超; 顾诚; 韩迪; 何海浪^*; 周贤梅^*

来源：中华肿瘤防治杂志, 2020, 27(05): 337-344.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2020.05.02

• 金复康口服液
• 淋巴管新生
• 肺癌
• 转移

目的中药制剂金复康口服液治疗肺癌的临床疗效已得到肯定,但机制尚不清楚。本研究探讨金复康口服液含药血清抑制肺癌淋巴管新生方向,探究其抑制肿瘤转移的分子学机制。方法将20只SD大鼠随机分为金复康口服液高剂量组〔15g/(kg·d)〕、中剂量组〔10g/(kg·d)〕、低剂量组〔5g/(kg·d)〕和Control组(生理盐水),每组5只。IL-4+为使用白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)刺激的RAW264.7细胞,IL-4-为无任何刺激干预的RAW264.7细胞。流式细胞术分析其细胞表面CD206表达来检测RAW264.7细胞极化成M2型的情况。根据含药血清将共培养模型分为高剂量组、中剂量组、低剂量组、Control组和Blank组(不加含药血清),Elisa法检测共培养模型下室培养基中血管内皮生长因子-C/D(vascular endothelial growth factor C/D,VEGF-C/D)蛋白含量;蛋白质印迹法检测下室Lewis细胞中VEGF-C/D的含量;实时q-PCR检测下室Lewis细胞中VEGF-C/D基因表达量。采用Graphpad prism for Mac(Version 8.1.1)、image J、FlowJo(Version 10.4)对数据进行统计分析。结果 M2型RAW264.7表型鉴定,CD206表达率IL4+为(58.45±1.45)%和IL-4-为(1.98±0.18)%,t=102.25,P<0.001。Elisa检测VEGF-C含量,高剂量组(2 866.07±70.97)pg/mL相对于Control组(3 252.97±94.51)pg/mL明显下降(t=5.47 P<0.01),VEGF-D高剂量组(58.43±17.3)pg/mL相对于Control组(117.7±7.3)pg/mL明显下降,t=5.47,<0.01;蛋白质印迹法检测Lewis细胞中VEGF-C含量,高剂量组(0.11±0.015)%相对于Control组(0.34±0.028)%明显下降(t=12.54,P<0.001),VEGF-D高剂量组(0.38±0.037)%相对于Control组(0.071±0.022)%明显下降,t=12.43,P<0.001;q-PCR测定Lewis细胞高剂量组中VEGF-C基因表达量(0.61±0.095)%相对于Control组(3.89±0.44)%明显下降(t=12.59,P<0.001),VEGF-D高剂量组(0.23±0.025)%相对于Control组(1.78±0.09)%明显下降,t=28.55,P<0.001。成管实验中高剂量组共培养模型下室中的培养基干预的HLEC细胞在Matrigel Matrix胶中形成管腔结构的数量明显减少。结论金复康口服液含药血清能够通过调控Lewis细胞合成VEGF-C/D,减少肺癌淋巴管新生从而达到抑制肿瘤转移。

• 单位
  南京中医药大学