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摘要
目的观察Foxo1基因过表达对鼠源性单核巨噬细胞RAW264.7中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及其受体CCR2表达的影响,探讨转录因子Foxo1在早期心血管疾病识别及预防中的作用。方法实验分为未转染的对照组、Foxo1基因转染组及空质粒转染组,Foxo1基因转染组的转染方法为:运用脂质体转染方法将pc DNA-Foxo1真核表达载体瞬时转染至RAW264.7细胞中。空质粒转染组的转染方法为:运用脂质体转染方法将pc DNA-3.1质粒瞬时转染至RAW264.7细胞中。通过Western blot检测细胞中Foxo1的过表达情况。采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白免疫印迹法分别检测各组细胞中MCP-1及CCR2的表达情况。采用transwell小室法检测各组细胞的迁移能力。结果 pc DNA-Foxo1重组质粒转染48 h后,RAW264.7细胞中Foxo1蛋白的表达量为(1.812±0.067),明显高于空质粒转染组的(1.092±0.088)和未转染组的(1.107±0.095),差异均有统计学意义(均P<0.05)。Foxo1基因转染组RAW264.7细胞中MCP-1 mRNA表达量为(3.331±0.587),明显高于空质粒转染组的(1.125±0.114)和未转染组的(1.121±0.065),差异均有统计学意义(均P<0.05)。Foxo1基因转染组RAW264.7细胞中MCP-1蛋白的表达量为(2.670±0.117),明显高于空质粒转染组的(1.128±0.107)和未转染组的(1.037±0.096),差异均有统计学意义(均P<0.05)。Foxo1基因转染组RAW264.7细胞中CCR2的mRNA的表达量为(2.099±0.331),明显高于空质粒转染组的(1.027±0.095)和未转染组的(1.018±0.177),差异均有统计学意义(均P<0.05)。计数Transwell小室膜下表面细胞数,结果显示Foxo1基因转染组RAW264.7细胞穿过小室的数量为(39.670±2.333)个,明显高于未转染组的(22.000±2.309)个,差异有统计学意义(P<0.05)。结论转录因子Foxo1过表达通过促进MCP-1及CCR2的表达从而增强RAW264.7细胞的迁移,参与巨噬细胞的炎症反应,推测Foxo1在心血管疾病早期识别及预防中具有重要作用。
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