EB病毒诱导基因3增强结肠癌5-氟尿嘧啶耐药株耐药性的研究

作者：梁艳芳; 叶子瑜; 马燕; 林碧华; 陈灿; 曾今诚

来源：重庆医学, 2020, 49(13): 2082-2086.

• EB病毒诱导基因3
• 结肠肿瘤
• 5-氟尿嘧啶
• 耐药细胞系

目的建立结肠癌(CRC)5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药株探讨EB病毒诱导基因3(EBI3)与CRC 5-Fu耐药的关系。方法采用5-Fu持续接触浓度递增诱导法建立人CRC耐药细胞系;CCK-8法检测细胞增殖和耐药性;4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察细胞核形态学改变;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡;EBI3CRISPR激活质粒和EBI3CRISPR/Cas9敲除质粒转染结肠癌耐药和非耐药细胞后,Western blot检测EBI3、细胞色素P450家族成员1B1(CYP1B1)和有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶2(MEKK2)表达。结果采用5-Fu持续接触浓度递增诱导法建立人结肠CRC细胞系SW1116/5-Fu和LoVo/5-Fu;细胞周期检测结果显示,与SW1116和LoVo细胞相比,SW1116和SW1116/5-Fu细胞周期各期百分比无明显差异(P>0.05)。与LoVo细胞相比,LoVo/5-Fu细胞G1期细胞百分比明显增高(P<0.05),S期细胞百分比明显降低(P<0.05);Western blot检测结果显示,与SW1116和LoVo细胞相比,SW1116/5-Fu和LoVo/5-Fu细胞EBI3、CYP1B1和MEKK2表达均明显增高;SW1116、SW1116/5-Fu、LoVo和LoVo/5-Fu细胞转染EBI3敲除质粒后,5-Fu作用细胞的半抑制浓度(IC50)值明显降低(P<0.05),而细胞转染EBI3激活质粒后,5-Fu作用细胞的IC50值明显增高(P<0.05)。结论 EBI3可能介导了CRC细胞对5-Fu的耐药过程。

• 单位
  广东医科大学; 暨南大学