虫草菌丝通过抑制TLR4/NF-κB信号通路与血管生成素样蛋白4对肝纤维化小鼠模型的保护作用

作者：张霖璋; 张定棋; 徐莹; 杨海琳; 戚胜兰; 张聪聪; 陈佳美; 刘平^*; 刘伟^*

来源：临床肝胆病杂志, 2022, 38(07): 1540-1547.

DOI：10.3969/j.issn.1001-5256.2022.07.016

• 肝硬化
• 血管生成素类
• Toll样受体4
• NF-κB

目的 探究虫草菌丝对CCl4诱导的肝纤维化小鼠模型的干预作用，及对Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)通路与血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)的影响。方法 将60只SPF级雄性C57/BL6J小鼠随机分为正常组、模型组、扶正化瘀方组及虫草菌丝低、中、高剂量组，每组各10只。模型组和各用药组注射15%CCl4-橄榄油，造模6周。在第4周首日开始给药，连续3周。分别采用血生化法检测小鼠血清ALT、AST、TBil水平或活性,HE和SR染色观察肝组织病理学，碱水解法测定肝组织羟脯氨酸(HYP)含量情况,PCR检测α-SMA、Col-Ⅰ的mRNA表达情况，免疫组化测定肝组织α-SMA、Col-Ⅰ与ANGPTL4蛋白表达,Western Blot检测α-SMA、ANGPTL4、TLR4、NF-κB/P-NF-κB、CD163蛋白的表达。计量资料多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 与正常组比较，模型组小鼠血清ALT、AST、TBil水平均显著增加(P值均<0.01);与模型组比较，虫草菌丝高剂量组显著改善小鼠肝纤维化程度，血清ALT、AST、TBil水平均显著减少(P值均<0.05)。HE染色发现虫草菌丝高剂量组能显著减少肝组织炎性细胞浸润。SR染色发现，虫草菌丝高剂量组明显减轻肝脏胶原沉积。与正常组比较，模型组肝组织HYP含量、SR阳性染色面积比均显著增加(P值均<0.01);与模型组比较，虫草菌丝高剂量组肝组织HYP含量、SR阳性染色面积比均显著减小(P值均<0.05)。与正常组比较，免疫组化、PCR和Western Blot结果显示模型组肝组织中α-SMA和Col-ⅠmRNA及蛋白表达显著增加(P值均<0.01);与模型组比较，虫草菌丝高剂量组肝组织中α-SMA、Col-Ⅰ胶原纤维表达均显著减少(P值均<0.05)。与正常组比较，模型组肝组织ANGPTL4、TLR4、P-NF-κB/NF-κB、CD163蛋白表达均显著增加(P值均<0.01);与模型组比较，虫草菌丝高剂量组肝组织ANGPTL4、TLR4、P-NF-κB/NF-κB、CD163蛋白含量均显著降低(P值均<0.05)。结论 虫草菌丝对CCl4诱导的小鼠肝纤维化具有显著治疗作用，其机制可能与调控TLR4/NF-κB信号通路及抑制肝组织ANGPTL4表达相关。

• 单位
  上海中医药大学; 上海中医药大学附属曙光医院