水稻抽穗期基因酵母双杂交cDNA文库的构建及分析

作者：彭强; 吴昌银

来源：华中农业大学学报, 2012, (04): 404-409.

DOI：10.13300/j.cnki.hnlkxb.2012.04.013

• 水稻抽穗期基因
• 酵母双杂交
• SMART技术
• cDNA文库
• 水稻倒二叶 flowering time gene in rice
• yeast two-hybrid
• SMART technology
• cDNA library
• rice penultimate leaf

为研究水稻开花调控的分子网络,构建了水稻品种中花11幼穗分化前倒二叶叶片的酵母双杂交cDNA文库。制备了高质量的总RNA,用Oligo(dT)引物反转录合成cDNA第一链和Long Distance PCR合成双链cD-NA,通过SMART同源重组交换技术在酵母菌株AH109中建立酵母双杂交所需的水稻倒二叶叶片cDNA文库。文库质量检测结果表明:cDNA文库的转化率为1.178×106/3μg pGADT7-Rec,文库滴度为2.65×108 cfu/mL,重组率为94.7%,插入片段长度为350～2 000bp。该文库可用来筛选水稻抽穗期基因的互作蛋白。

• 单位
  华中农业大学; 作物遗传改良国家重点实验室