原花青素减轻TCP磨损颗粒诱导的骨细胞氧化损伤

作者：金晶晶; 楼佳琪; 王脉; 陈晓斌; 杨子键; 黄君瑶; 张云^*

来源：中国病理生理杂志, 2019, 35(09): 1676-1682.

• 磷酸三钙磨损颗粒
• 骨细胞
• 原花青素
• 氧化应激
• NLRP3炎症小体
• 细胞焦亡

目的:研究原花青素(PC)对磷酸三钙(TCP)磨损颗粒诱导的骨细胞氧化损伤的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将TCP磨损颗粒(0.1 g/L)与小鼠长骨MLO-Y4骨细胞共孵育构建骨细胞体外损伤模型,实验分为4组:正常对照(control)组、TCP组、PC(10μmol/L)组和PC(50μmol/L)组。应用Calcein-AM染色和MTT等方法检测骨细胞活力;ELISA检测细胞培养上清液中牙本质基质蛋白1(DMP-1)、骨硬化蛋白(SOST)及白细胞介素1β(IL-1β)水平;流式细胞术定量分析骨细胞凋亡情况;化学比色法检测骨细胞中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,以及细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)释放量;Western blot法检测骨细胞中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、含CARD的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、cleaved caspase-1和IL-1β蛋白水平的变化。结果:与control组比较,TCP组MLO-Y4细胞的损伤、凋亡率及MDA含量显著增加(P<0.05),SOD活性显著降低(P<0.05),NLRP3、ASC、cleaved caspase-1和IL-1β蛋白水平显著上调,上清液中IL-1β和LDH的水平明显增加(P<0.05);与TCP组比较,PC组MLO-Y4细胞的损伤明显减轻,凋亡率显著降低(P<0.05),NLRP3、ASC、cleaved caspase-1和IL-1β的蛋白水平显著下调(P<0.05),IL-1β和LDH水平明显降低(P<0.05)。结论:PC可明显抑制TCP磨损颗粒诱导的骨细胞氧化损伤,其机制可能与减轻NLRP3炎症小体的活化和细胞焦亡相关。

• 单位
  绍兴文理学院