摘要
目的 探讨circ-0008583对肝癌细胞系增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法 生物信息学分析联合临床样本和体外细胞实验验证circ-0008583在肝癌中的表达水平。RNase R和放线菌素D处理验证circ-0008583的circRNA特性。克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,TUNEL染色检测细胞凋亡。RIP实验检测circ-0008583和EIF4A3是否结合。qRT-PCR和Western blot检测基因表达水平。结果 与正常肝组织及细胞系相比,circ-0008583在肝癌组织和细胞系中高表达(均P <0.001)。circ-0008583具有环状结构,与DLG1 mRNA相比,其稳定性增加(P <0.001)。与阴性对照组相比,干扰circ-0008583表达后肝癌细胞的克隆形成能力降低(P <0.01),凋亡水平上升(P <0.001)。Circular RNA Interactome数据库和RIP实验证实circ-0008583能够与EIF4A3蛋白结合。与正常肝组织及细胞系相比,EIF4A3在肝癌组织及细胞中高表达(P <0.001)。过表达EIF4A3能够在一定程度上逆转干扰circ-0008583表达对肝癌细胞增殖的抑制作用以及凋亡的促进作用。结论 circ-0008583在肝癌组织及细胞系中高表达,其与EIF4A3蛋白结合促进肝癌细胞增殖,并抑制肝癌细胞凋亡。
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单位贵州省人民医院; 天津医科大学; 黔南布依族苗族自治州人民医院