艾灸“天枢”穴对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠组织铁死亡及氧化损伤的影响

作者：刘力; 卢云琼; 曹姚佳妮; 李红娜; 金悠悠; 孔谐和; 樊晓鹏; 洪珏; 马晓芃; 张丹^*

来源：中医杂志, 2023, 64(15): 1576-1584.

DOI：10.13288/j.11-2166/r.2023.15.012

• 溃疡性结肠炎
• 艾灸
• 天枢穴
• 铁死亡
• 氧化损伤

目的 探讨艾灸天枢穴治疗溃疡性结肠炎（UC）的可能作用机制。方法 将42只SD大鼠随机分为正常组9只和造模组33只。造模组采用自由饮用3.5%葡聚糖硫酸钠盐（DSS）溶液7天制备UC大鼠模型。32只造模成功，将其随机分为模型组、艾灸组、铁死亡抑制剂组、溶媒对照组，每组8只。正常组和模型组只做与干预组相同的抓取固定；艾灸组取“天枢穴”（双侧）进行温和灸，每次每穴10 min；铁死亡抑制剂组采用浓度为6 mg/ml的铁死亡抑制剂利普司他丁-1 (Liproxstatin-1)以10 mg/kg腹腔注射；溶媒对照组给予5%二甲基亚砜（DMSO） 1.67 ml/kg腹腔注射。各组均每日1次，连续8天。干预后进行结肠大体形态损伤指数（CMDI）评分，HE染色观察大鼠结肠组织形态结构变化，酶联免疫吸附测定法检测血清二胺氧化酶（DAO）表达，微板法检测血清D-乳酸（D-LA）含量，TUNEL染色观察结肠细胞死亡情况，免疫荧光法检测结肠组织活性氧（ROS）表达，比色法检测结肠铁离子的含量，免疫组织化学法检测结肠谷胱甘肽过氧化物酶4 (GPX4)表达。结果 与正常组比较，模型组与溶媒对照组大鼠结肠结构破坏严重，CMDI评分升高（P<0.01）,HE染色可见浅表性溃疡，黏膜层破坏明显，黏膜下层大量炎性细胞浸润和水肿，结肠细胞死亡数增多，血清DAO、D-LA及结肠组织铁离子、ROS含量均增多，结肠组织GPX4蛋白表达减少（P<0.05或P<0.01）。与模型组比较，艾灸组、铁死亡抑制剂组大鼠结肠黏膜、腺体有不同程度修复，肠道炎症减轻，细胞死亡数显著减少，CMDI评分明显降低，血清DAO、D-LA及结肠组织ROS、铁离子含量均明显减少，结肠组织GPX4蛋白表达增多（P<0.05或P<0.01）。结论 艾灸“天枢穴”能降低结肠组织铁离子和ROS含量，上调GPX4蛋白表达，抑制铁死亡，可能是其促进UC结肠黏膜愈合、治疗UC的作用机制之一。

• 单位
  上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院; 上海市针灸经络研究所