摘要
目的 通过观察红芪多糖(Hedysarum Polysacchcrides, HPS)对高糖培养下雪旺细胞(Schwann Cells, SCs)核转录因子-κB(nuclear factor kappa-B, NF-κB)、白细胞介素-1β(IL-1β)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved caspase-3)信号通路的影响,探讨红芪多糖在治疗糖尿病周围神经病变(DPN)过程中可能作用机制。方法 选取出生5~7 d的SD乳鼠4只,从坐骨神经部位提取雪旺细胞,常规培养后,CCK8法筛高糖、HPS、α-LA实验浓度,随机分为正常组、高糖组、红芪多糖组、α-硫辛酸(α-LA)组,免疫蛋白印迹法(Western-blot)、逆转录-免疫酶联反应(RT-PCR)法检测NF-κB、IL-1β、Cleaved caspase-3蛋白与mRNA表达情况,免疫荧光法检测特异性蛋白S-100β及GFAP表达,Annexin V/PI双染法检测各组雪旺细胞的凋亡率。结果 Western-blotting、RT-PCR结果显示,与正常组比较,高糖组NF-κB、IL-1β、Cleaved Caspase-3蛋白与mRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与高糖组比较,HPS组、α-LA组NF-κB、IL-1β、Cleaved caspase-3蛋白与mRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。免疫荧光法检测结果显示,雪旺细胞质中S-100β和GFAP染色呈绿色荧光表达,而阳性对照组只见DAPI核染,未见绿色荧光染色。Annexin V/PI双染法检测结果显示,与正常组比较,高糖组雪旺细胞凋亡率明显增加;与高糖组比较,HPS组和α-LA组雪旺细胞凋亡率显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 红芪多糖可以减轻雪旺细胞炎症状态下的凋亡反应,其作用机制可能与抑制IL-1β/NF-κB信号通路激活有关。
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